當流動相中攜帶的混合物流經固定相時，其與固定相發生相互作用。由于混合物中各組分在性質和結構上的差異，與固定相之間產生的作用力的大小、強弱不同，隨著流動相的移動，混合物在兩相間經過反復多次的分配平衡，使得各組分被固定保留的時間不同，從而按一定次序由固定相中流出。

快速液相色譜柱的結構及其主要功能

由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲(封頭)與柱填料等組成。

 

柱管：多用不銹鋼制成，若果使用時柱壓不高于70kg/cm2時，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內壁要求有很高的光潔度。用于柱填料的裝填。

 

壓帽：即色譜柱兩端套合于柱管端外壁的塑性圓柱帽，中部有小孔，多為聚四氟乙烯制成，用于固定篩板。

 

密封環：位于接頭螺旋環內壁的彈性環，多為聚四氟乙烯制成，用于色譜柱兩端壓帽與柱外壁的密封。

 

如何更好的使用快速液相色譜柱

1.拿到色譜柱后先閱讀說明書，了解色譜柱的具體性能：耐受溫度、耐受ＰＨ等。以及色譜柱的沖洗和保存條件。經過柱校測試確認色譜柱本身沒有問題后方可正常使用。

 

2.樣品充分前處理，確保樣品的潔凈；使用保護柱或在線過濾器，根據實際情況更換保護柱芯或濾片。

 

3.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。

 

4.應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中如果流動相中使用了緩沖鹽，避免出現鹽析。

 

5.選擇使用適宜的流動相（尤其是PH），以避免固定相被破壞，PH過低共價鍵斷裂，鍵和相水解；PH過高硅膠溶解。

 

6.使用過程中，如果壓力升高，或出現污染，選擇適當的條件沖洗或反沖。