影響分離的因素與提高
反相高效液相色譜柱柱效的途徑：
（1）液體的黏度比氣體大一百倍，密度為氣體的一千倍左右，故降低傳質阻力是提高柱效主要途徑。
（2）由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。
（3）液相色譜中，不可能通過增加柱溫來改善傳質。
（4）恒溫改變淋洗液組成、極性是改善分離的最直接的因素。
（5）流速大于0。5cm/s時，H～u曲線是一段斜率不大的直線。降低流速，柱效提高不是很大。但在實際操作中，流量仍是一個調整分離度和出峰時間的重要可選擇參數(shù)。
（6）氣相色譜中的固定液原則上都可以用于液相色譜，其選用原則與氣相色譜一樣。但在高效液相色譜中，分離柱的制備是一項技術要求非常高的工作，一般很少自行制備。
避免反相高效液相色譜柱過高的柱壓：
雖然色譜柱能耐受的壓力可達6000psi（磅/平方英寸），但過高及過大的壓力變化均會縮短色譜柱的壽命，避免的方法是：
（1）柱壓過高時，盡可能采用較小的流速，以不超過柱最大允許壓力的一半為宜。
（2）當流速較大時，應采取流速梯度的辦法使流速分步到位。
（3）使用手動進樣閥時，進樣閥的切換要盡可能的快。否則超過20%的壓力沖擊會很快使柱報廢。當使用多柱聯(lián)用時，柱切換要避免在高壓下進行。
